牛血清白蛋白試劑盒怎樣使用以避免試驗(yàn)誤差?
瀏覽次數(shù):745發(fā)布日期:2019-09-11
牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin)是牛血漿中的主要蛋白質(zhì),在細(xì)胞培養(yǎng)、體外診斷、人類和獸醫(yī)藥物、分子生物學(xué)、血清學(xué)和一般研究等方面有著廣泛的應(yīng)用。bovogen生物制品的BSA是使用一個(gè)專有的兩步純化/熱沖擊過程中產(chǎn)生一個(gè)非常穩(wěn)定的高質(zhì)量產(chǎn)品的牛身清蛋白。
原料來源:
由澳大利亞或新西蘭的動(dòng)物血漿制成,由注冊(cè)出口的屠宰場(chǎng)在政府獸醫(yī)主管部門監(jiān)督下收集,經(jīng)過獸醫(yī)事前和宰后檢測(cè)合格方可。
應(yīng)用:
組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、培養(yǎng)基中的一般添加劑、蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)、一般研究或診斷試劑、疫苗、免疫分析中的阻斷劑、蛋白酶敏感免疫分析試劑、脂肪酸敏感細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中添加劑、協(xié)助免疫h(yuǎn)aemaglutination添加劑。
外觀:白色或類白色凍干粉;
(1)抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
(2)結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
(3)酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
(4)受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5)此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6)加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。
操作牛血清白蛋白試劑盒時(shí)需注意:
1.不同的試劑盒因工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性.
2.若不同批號(hào)elisa試劑盒的不同組分(a液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3.反應(yīng)時(shí)間的誤差,做大量標(biāo)本時(shí),孔和后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
4.臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正?,F(xiàn)象,任何試劑均不可避免??梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
5.加樣時(shí)樣品量誤差,對(duì)于陰或很陽(yáng)的標(biāo)本影響不大,但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響極大,建議校對(duì)加樣器。
6.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
7.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
8.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
9.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
10.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
11.底物請(qǐng)避光保存。
12.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
13.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
14.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
15.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。