用LAMP鑒定試劑盒進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，什么事項(xiàng)該注意？
瀏覽次數(shù)：754發(fā)布日期：2020-08-20
LAMP鑒定試劑盒引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是體外酶促合成特異DNA段的一種方法,由高溫變性、低溫退火(復(fù)性)及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、省時(shí)等特點(diǎn)。 特異性強(qiáng) PCR反應(yīng)的特異性決定因素為: ①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合...”
LAMP鑒定試劑盒具有下列特點(diǎn)：
1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增巴戟天，與其他植物沒(méi)有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
LAMP鑒定試劑盒用途：
1. 方便，用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷，操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化，能減少污染，降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料，PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳，進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，反應(yīng)的靈敏度高，特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見(jiàn)的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆，不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果：將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板，引物和水共15 μL 混合后，直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定)，反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
LAMP鑒定試劑盒使用注意事項(xiàng)：
?、偌尤朐噭┑捻樞驊?yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
?、谑褂酶蓛舻乃芰先萜髋渲孟礈煲?。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
?、艿孜顰應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
?、奘褂靡淮涡缘奈^以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
?、嘣噭?yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
?、岵挥玫钠渌噭?yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
在線咨詢