細(xì)胞株開(kāi)發(fā)過(guò)程簡(jiǎn)單敘述以及購(gòu)買注意事項(xiàng)
瀏覽次數(shù)：823發(fā)布日期：2020-10-12
細(xì)胞株開(kāi)發(fā)(Cell line development，CLD)的過(guò)程與生物藥開(kāi)發(fā)的早期所涉及過(guò)程有所不同。創(chuàng)建穩(wěn)定的用于的高產(chǎn)細(xì)胞株的步驟包括：宿主細(xì)胞株選擇，表達(dá)載體工程，轉(zhuǎn)染，克隆和細(xì)胞擴(kuò)增，以及各種篩選步驟，從而選擇細(xì)胞活力高，生長(zhǎng)能力強(qiáng)，并且表達(dá)水平、以及表達(dá)的穩(wěn)定性、質(zhì)量情況都具有高表現(xiàn)的單克隆細(xì)胞株。這一過(guò)程，不同的企業(yè)平臺(tái)也可以采用許多不同的策略來(lái)優(yōu)化其工作流程，而其中的篩選過(guò)程直接決定了細(xì)胞形成單克隆細(xì)胞株的水平，因而顯得尤為重要。
一些經(jīng)驗(yàn)豐富的專家，也對(duì)此有著深刻的見(jiàn)解。來(lái)自Pathway Biopharma的CEO Jon Dempsey博士指出，由于CLD和*臨床藥物的開(kāi)發(fā)正處于將新型療法推向臨床試驗(yàn)的關(guān)鍵階段，因此公司正在尋求采取一切可能的措施來(lái)加快開(kāi)發(fā)過(guò)程。如果今天我要構(gòu)建CLD系統(tǒng)，那么我將首先談到以下四個(gè)階段：
1、工作流程的制定，然后在過(guò)程中使用定向進(jìn)化或克隆選擇來(lái)設(shè)計(jì)適合此工作流程的細(xì)胞系。
2、使用合成載體技術(shù)，從而促進(jìn)表達(dá)。
3、運(yùn)用自動(dòng)化平臺(tái)，消除單輪細(xì)胞克隆的過(guò)程，從而消除手工流程，加速進(jìn)程。
4、減少細(xì)胞倍增時(shí)間，使工作盡可能的聚焦于細(xì)胞快速生長(zhǎng)。
購(gòu)買細(xì)胞株注意事項(xiàng)：
客戶收到細(xì)胞后請(qǐng)務(wù)必仔細(xì)閱讀細(xì)胞注意事項(xiàng)，確保細(xì)胞的培養(yǎng)條件一致，如果由于培養(yǎng)條件不一致導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任有客戶自行承擔(dān)。
1.客戶在收到細(xì)胞時(shí)，請(qǐng)首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否外滲，培養(yǎng)液是否混濁。如發(fā)現(xiàn)有瓶破、滲漏、培養(yǎng)液混濁等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏郊?xì)胞后立即與我們聯(lián)系。
2.由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)離心收集，重懸細(xì)胞，置培養(yǎng)箱培養(yǎng)，細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力。
3.收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)按照細(xì)胞處理方法處理細(xì)胞。
4.購(gòu)買細(xì)胞的客戶有培養(yǎng)細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn)，客戶收到細(xì)胞，原瓶里的培養(yǎng)液可以收集繼續(xù)使用，在di一次消化傳瓶時(shí)，我們要求客戶留一瓶細(xì)胞繼續(xù)使用我們的培養(yǎng)液，其它瓶的細(xì)胞客戶可使用自己的培養(yǎng)液，這樣可減少由于細(xì)胞不適應(yīng)培養(yǎng)液導(dǎo)致的細(xì)胞問(wèn)題。
在線咨詢