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植物檢測試劑盒實驗原理及程序
瀏覽次數(shù):1452發(fā)布日期:2020-11-11

植物檢測試劑盒試驗原理:

植物檢測試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。

  植物檢測試劑盒操作程序:

    1. 棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復(fù)5次,拍干。

    2. 每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。。

    3. 取出酶標板,每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

    4.測定:以空白孔調(diào)零,在450nm波長下測量各孔的吸光度值(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

    5.根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了的,其實際濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù)。

  植物檢測試劑盒特點:

    一、高效、靈敏、特異的抗體;

    二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;

    三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;

    四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;

    五、節(jié)省實驗經(jīng)費。