
菌株實(shí)驗(yàn)操作
1.取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在室溫(20-25℃)進(jìn)行。
2.取出酶標(biāo)板,按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50 μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3.空白微孔中加入50 μl的樣品,空白對(duì)照加入100μl的蒸餾水。
4.在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液(不含空白對(duì)照孔)。
5.將酶標(biāo)板用封口膠密封后,37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí)(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)。
6. 充分清洗酶標(biāo)板5次,保持各孔有充足的水壓(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋
7.酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙拍干。
8.各孔加入顯色劑A 50 μl。
9.各孔加入顯色劑B 50 μl。
10.20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘。
11.各孔加入50μl終止液,終止反應(yīng)。
菌株處理方式
1、采集血漿時(shí)一般不加抗凝劑(主要為枸櫞酸鹽和檸檬酸鹽),采集后立即離心800-1000rmp x 5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆?
1.1、血液包括血漿和血清,它們的主要區(qū)別就是:血清凝血而血漿不凝血,所以它們的處理方式也就不一樣
1.2、如要采集血清,一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室溫或4℃靜置半小時(shí)后,800-1000rmp x 5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆?
2、胃液和唾液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用,ELISA試劑盒但是一般飯后半小時(shí)內(nèi)不易采集,因?yàn)閯傔M(jìn)食的唾液中富含豐富的唾液淀粉酶,的采集的時(shí)間時(shí)空腹采集;
3、組織提取液如肺泡灌洗液等,采集后離心分離,800-1000rmp x 5min,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆?
4、尿液的采集方式基本和唾液一樣的,即現(xiàn)采現(xiàn)用,但是一般隔夜尿不采集;