這些關(guān)于耐藥的PC3細(xì)胞培養(yǎng)的小知識(shí),你一定要牢牢掌握
瀏覽次數(shù):788發(fā)布日期:2021-03-26
耐藥的PC3細(xì)胞的原理:
在不加任何條件下直接凍存細(xì)胞時(shí),細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等,能引起細(xì)胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護(hù)劑,可使冰點(diǎn)降低。在緩慢的凍結(jié)條件下,能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞。貯存在-130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成。
細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)速度要快,使之迅速通過(guò)細(xì)胞最易受損的-5~0℃,細(xì)胞仍能生長(zhǎng),活力受損不大,目前常用的保護(hù)劑為二甲亞砜(DMSO)和甘油,它們對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性,分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞。
MTT比色法,是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。
其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無(wú)此功能。
二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。
在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。
它的特點(diǎn)是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)。
293細(xì)胞 T25培養(yǎng)瓶 貼壁生長(zhǎng) 90% DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃
293FT細(xì)胞 T25培養(yǎng)瓶 貼壁生長(zhǎng) 90% 高糖DMEM 、10% FBS 5% CO2,95% AIR 37 ℃