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幾種常用細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品

⒈ BME(basal medium eagle)基礎(chǔ)伊格培養(yǎng)基

⒉ MEM

⒊ DMEM

⒋ IMDM

⒌ RPMI-1640

⒍ M199

⒎ Mccoy's 5A

⒏ F10\ F12 \DMEM混合F12

幾種常用細(xì)胞培養(yǎng)配套試劑的配置(緩沖液、平衡鹽溶液等)

1、無(wú)鈣、鎂、離子溶液(1000ml)

氯化鈉(NaCl)8g磷酸二氫鈉、(NaH2PO4H20)0.05g、碳酸氫鈉(NaHCO3)1g、檸檬酸三鈉(Na3C6H5O7,H20)1g、葡萄糖1g、加去離子水或雙蒸水至1000mL

2、PBS(Phosphate-Buffered saline)磷酸鹽緩沖液

甲液:0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液、磷酸氫二鈉(無(wú)水)28.4g、氯化鈉8.77g加去離子水或雙蒸水至1000mL

乙液:0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液、磷酸二氫鈉(無(wú)水)2.4g、氯化鈉8.77g加去離子水或雙蒸水至1000mL

甲、乙液于4℃保存，使用時(shí)按表3-2所示比例，配制成所需pH濃度，高壓滅菌后室溫保存。

3、Hanks液(HBSSHank's Balanced salt solution)

 ⑴ 母液甲(20x)配法

①NaCl(A.R)160g、KCl(A.R)8g、MgSO4.7H2O(A.R)2g、MgCl.6H2O(A.R)2g依次溶于800mL雙蒸水中，前一物質(zhì)溶后再加后一種。

②CaCl2(A.R)2.8g溶于100mL雙蒸水中，溶時(shí)不斷攪拌(此液應(yīng)單配，單溶)。

待上述兩溶液中的"溶質(zhì)"全溶后，將它們混合，再用雙蒸水補(bǔ)至1000mL，向其中加2mL作為防腐劑，置4℃保存。

 ⑵ 母液乙(20×)配法

①Na2HPO4.12H2O(A.R)3.04g、KH2PO4(A.R)1.20g、葡萄糖(A.R)20.0g溶于800ml雙蒸水中。

②0.4%酚紅液0.4g酚紅放在玻璃研缽后加0.01N、NaOH11.28mL，直到全部溶解，移入100mL容量瓶中，加水至100mL，過(guò)濾，pH為7.4，4℃保存。

待上述各"溶質(zhì)"*溶解后，用雙蒸水補(bǔ)至1000mL,其中加2mL作防腐劑，置40℃保存。

（3) 使用液(1×)配法

取母液甲和母液乙各一份，加雙蒸水18份，分裝后，塞好瓶塞，掛上標(biāo)志。以115℃高壓滅菌25分鐘(以免葡萄糖破壞)，置室溫后4℃保存，可使用幾個(gè)月。臨用前，用7.5%NaHCO3調(diào)至所需pH。

4、Eagle's液(EBSSEagle's Balanced salt solution)

是一種在二氧化碳(CO2)環(huán)境中短期維持細(xì)胞活性的平衡鹽溶液，可用于細(xì)胞解離前的清洗、細(xì)胞或組織的運(yùn)輸、細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)稀釋、溶液的配置等。

5、HEPES液

生物緩沖液，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，在PH7.2~7.6范圍內(nèi)，比NaHCO3緩沖液的緩沖能力更強(qiáng)。

6、NaHCO3緩沖液

常規(guī)緩沖體系的一部分，但是不穩(wěn)定，易受空氣中CO2的含量而改變PH值，影響緩沖效果。