關(guān)于多克隆抗體制備流程，以下有詳細介紹
瀏覽次數(shù)：772發(fā)布日期：2021-10-24
多克隆抗體一般通過免疫接種合適的哺乳類動物而產(chǎn)生，例如小鼠、兔子或者山羊。通常更傾向于采用大型哺乳類動物，因為可以采集更多的血清。首先將抗原注射到哺乳動物體內(nèi)，（一般幾星期后）誘導(dǎo) B-淋巴細胞產(chǎn)生抗原特異性的免疫球蛋白 (IgG)。該哺乳動物血清經(jīng)過純化可得到多克隆 IgG。
優(yōu)勢：
1、由于多克隆抗體具有多個表位結(jié)合位點，可與靶蛋白的多個表位結(jié)合，所以，多克隆抗體有助于放大低表達水平的靶蛋白信號，但是，從結(jié)果的準確性來說，這個優(yōu)勢也是劣勢，它會給定量實驗造成不利影響，使結(jié)果變得不準確。
2、由于能識別多個表位，多克隆抗體更適用于IP/ChIP實驗，可得到更好的結(jié)果。
3、制備時間短，所需技術(shù)和技能要求不高，成本比單克隆抗體低，穩(wěn)定性強。
4、雙抗夾心法ELISA中捕獲抗體選擇多克隆抗體，可以快速捕獲靶蛋白。
多克隆抗體制備流程：
1、抗原制備：
a、蛋白抗原制備：擁有密碼子優(yōu)化平臺及可溶性蛋白表達平臺，可得到>90%純度的可溶性抗原；
b、多肽抗原制備：針對特定的蛋白結(jié)合位點序列設(shè)計合成多肽，并與KLH綴合用于免疫。
2、免疫宿主：
每只宿主進行4次免疫，包括初次免疫（加入*弗氏佐劑）和3次加強免疫（加入不*弗氏佐劑）。
3、抗體純化：
提供兩種抗體純化方法，即抗原親和純化和Protein A/G純化。
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