能否使用好植物直接PCR試劑盒，這5個(gè)事項(xiàng)是關(guān)鍵
瀏覽次數(shù)：497發(fā)布日期：2022-09-22
植物直接PCR試劑盒可直接從植物樣品擴(kuò)增DNA。在PCR之前無需進(jìn)行DNA純化。該試劑盒基于Phire熱啟動(dòng)II DNA聚合酶，一種含DNA結(jié)合域的特別設(shè)計(jì)的酶。此款DNA聚合酶的*特性使其性質(zhì)極其穩(wěn)定，能夠耐受植物、真菌和細(xì)菌中存在的多種PCR抑制劑。
該試劑盒含有一整套經(jīng)過優(yōu)化的PCR試劑以及針對(duì)不同類型樣品的詳細(xì)實(shí)驗(yàn)方案，因而成為植物DNA擴(kuò)增的理想選擇。此外，該試劑盒還含有陽性對(duì)照反應(yīng)的對(duì)照引物。該對(duì)照引物可擴(kuò)增高度保守的葉綠體DNA區(qū)域，同時(shí)適用于多種植物物種。
產(chǎn)品亮點(diǎn)：
1.無需耗時(shí)且昂貴的DNA純化步驟；
2.所需的樣品材料極少；
3.針對(duì)不同應(yīng)用提供了兩種簡單的實(shí)驗(yàn)方案；
4.Phire熱啟動(dòng)II DNA聚合酶可以較短的延伸時(shí)間提供更高的特異性產(chǎn)物產(chǎn)量 (20 s/kb)。
植物直接PCR試劑盒的注意事項(xiàng)：
1.做葉片實(shí)驗(yàn)時(shí)，建議使用新鮮采取的葉片組織，若為長期冷凍組織，需-80℃保存，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，以免造成模板降解，影響PCR效率。葉片組織以幼嫩為宜，若為成熟的葉片，避免使用葉片主脈部位組織。
2.建議擴(kuò)增片段長度1kb以內(nèi)，以便擴(kuò)增效率較好。
3.取樣時(shí)使用打孔器或者刀取適宜大小的樣本，樣本不同時(shí)，打孔器或者刀每次處理樣本前需清洗干凈。
4.對(duì)于葉片組織，建議取1-10mm的葉片，過小會(huì)使PCR擴(kuò)增產(chǎn)量低，過多會(huì)抑制PCR反應(yīng)，采用加熱裂解法、槍頭搗碎、研磨儀破碎的方式處理植物葉片，處理后需震蕩離心，務(wù)必取上清液試驗(yàn)，沉淀會(huì)嚴(yán)重抑制PCR反應(yīng)。
5.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
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