
這下你知道你ELISA實(shí)驗(yàn)不成功了吧
信心滿滿地做 ELISA 實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線能做出來,但血清顯色幾乎無(wú)差異性?!
一旁的師姐意味深長(zhǎng)地看了我一眼:
樣品收集合格了嗎?
樣品保存合格了嗎??
樣品稀釋合格了嗎???
我:……>--->●
于是師姐給我推薦了一款 DLDEVELOP 的 ELISA 試劑盒。這款試劑盒運(yùn)用競(jìng)爭(zhēng)抑制 ELISA 法定量測(cè)定小鼠血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體中 GHRL 含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)抑制酶聯(lián)免疫分析法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)水平。將饑餓素單克隆抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中同時(shí)加入生物素標(biāo)記的抗原和待測(cè)抗原 (標(biāo)準(zhǔn)品或樣本),待測(cè)抗原與生物素標(biāo)記抗原對(duì)特異性抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。
溫育后經(jīng)洗滌去掉未結(jié)合物,然后加入 HRP 標(biāo)記的親和素,經(jīng)過溫育和*洗滌后加入底物 TMB 顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。
待測(cè)標(biāo)本濃度越高,標(biāo)記抗原和抗體的結(jié)合就越受到抑制,顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關(guān),而與樣品中待測(cè)物質(zhì)含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D. 值),計(jì)算樣品濃度。
產(chǎn)品特點(diǎn)
試劑盒穩(wěn)定性:經(jīng)測(cè)定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于 5%。
特異性:本試劑盒用于檢測(cè)目的蛋白,經(jīng)檢測(cè)與其它相似物質(zhì)無(wú)明顯交叉反應(yīng)。
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè), 每份樣本連續(xù)測(cè)定 20 次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及 SD 值。CV<>
批間差:選取 3 個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定 8 次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及 SD 值。CV<>
超長(zhǎng)保質(zhì)期:12 個(gè)月
試劑盒內(nèi)容
需自備的設(shè)備及試劑
1. 450±10 nm 濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的 EP 管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器