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靈敏度更高的定點突變試劑盒
瀏覽次數(shù):655發(fā)布日期:2020-01-02

定點突變試劑盒可以在克隆于質(zhì)粒DNA序列的特定位點誘導突變。理論上可以保證突變率達到100%。整個實驗過程簡單快捷只需要兩個步驟。試劑盒不需要用到M13載體和甲基化步驟。該試劑盒可以誘導某個已知基因的特定堿基進行定點突變、再突變成野生型、密碼子突變、插入或者缺失等,因此可以用于功能基因組學和蛋白質(zhì)組學的研究。另外由于試劑盒能夠誘導特異基因突變,又可以應用于蛋白質(zhì)工程學研究領域。定點突變試劑盒操作十分簡單(根據(jù)我們提供的引物設計原則設計引物;用Muta-direct™酶進行15~18個循環(huán)的PCR擴增反應;Mutazyme™酶處理選擇突變克??;轉(zhuǎn)化)。理論上在LB平板上的克隆100%是突變克隆,通過對突變克隆的測序分析,正確的突變可以應用于后續(xù)實驗。

基因定點突變常用于研究基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控、RNA或蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能,以及用于質(zhì)粒中部分序列的微調(diào)等。

本試劑盒使用了新的保真性更強,靈敏度更高,擴增速度可達2kb/min,擴增長度可達12kb的BeyoFusion™ DNA Polymerase,從而大大縮短了突變反應所需的時間,進一步提高了基因定點突變的成功率。同時進一步嚴格驗證了試劑盒中的DpnI,確保能在5分鐘內(nèi)充分消化掉甲基化的模板質(zhì)粒,同時不會消化未甲基化的PCR產(chǎn)物。