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考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒(比色法)

  • 更新時間:  2023-10-15
  • 產(chǎn)品型號:  AS6321370
  • 簡單描述
  • 考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒(比色法)在酸性溶液中,考馬斯亮藍G-250與蛋白質(zhì)結(jié)合形成藍色復合物;該復合物在620nm處有最大吸收峰, 其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比。該方法靈敏度高,適合微量蛋白質(zhì)分析。
詳細介紹

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貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

AS6321370

考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒(比色法)

100管/96樣

AS6321370

考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒(比色法)

50管/48樣

測定意義:

樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。

測定原理:

在酸性溶液中,考馬斯亮藍G-250與蛋白質(zhì)結(jié)合形成藍色復合物;該復合物在620nm處有最大吸收峰, 其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比。該方法靈敏度高,適合微量蛋白質(zhì)分析。

自備儀器和用品:

離心機、酶標儀、96孔板、移液器和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體11 mL×1瓶,4℃保存。

樣品中可溶性蛋白質(zhì)提?。?/p>

  1. 液體樣品:澄清液體樣品可以直接測定。

  2. 組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:20的比例(建議稱取約0.05 g組織,加入1mL提取液(自備,根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水))

冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即待測液。(動物樣品常常需要稀釋)

  1. 細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

測定操作:

  1. 酶標儀預熱30 min。

  2. 在96孔板中加入:

試劑(μL)

測定管

空白管

樣本

100


蒸餾水


100

試劑一

100

100

混勻后,測定波長620 nm吸光值,△A=A測定-A空白。

注意:空白管只需要測定一次。

計算公式:

標準曲線:y = 7.1265x - 0.0007  R2 = 0.9997    x: 蛋白標準品濃度(mg/mL)

                                                 y: 吸光值差值

1.按液體樣本體積計算:

Cpr(mg/mL)=(△A+0.0007)÷7.1265

                                 =0.1403×(△A+0.0007)

2.按組織樣本質(zhì)量計算:

                    Cpr(mg/g)=(△A+0.0007)÷7.1265×V總÷W            

=0.1403×(△A+0.0007)÷W

V總:提取液體積,1 mL; W:樣本質(zhì)量,g。

1.jpg


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