
食品中亞硝酸鹽含量測試盒(比色法)
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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS632195 | 食品中亞硝酸鹽含量測試盒(比色法) | 100管/96樣 |
AS632195 | 食品中亞硝酸鹽含量測試盒(比色法) | 50管/48樣 |
測定意義:
在食品中,亞硝酸鹽可與肉品中的肌紅素結(jié)合而更安定,在食品加工業(yè)中作為保色劑,以維持肉制品的良好外觀,并防止肉毒梭狀芽孢桿菌的產(chǎn)生,提高食用肉制品的安全,但是人體長期攝入亞硝酸鹽過量的食品,可誘發(fā)消化系統(tǒng)癌變。
測定原理:
在酸性條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸反應(yīng)生成重氮化合物,再與N-1-萘基乙二胺形成紫紅色偶氮化合物,在540nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、研缽或勻漿器、水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液一:液體50 mL×1瓶,室溫保存。
提取液二:液體50 mL×1瓶,室溫保存。
提取液三:液體50 mL×1瓶,室溫保存。
粉劑四:粉劑 100 mg ×1支,室溫保存。
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理:
稱取樣品約0.2g鮮重或0.05g干重,破碎,加入0.5 mL 提取液一,沸水浴15min,冷卻至室溫,加入0.5 mL提取液二,震蕩搖勻,加0.5 mL 提取液三,用鑷子加少量粉劑四(約1 mg),靜置30min,25℃,8000g離心15 min,取上清液待測。
測定步驟和操作表:
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至540nm,蒸餾水調(diào)零。
操作表
測定管 | 空白管 | |
蒸餾水(µL) | 70 | |
樣品(µL) | 70 | |
試劑一(µL) | 65 | 65 |
試劑二(µL) | 65 | 65 |
混勻,25℃靜置15min,于微量石英比色皿/96孔板中檢測540nm處吸光值A(chǔ)。 △A=A測定 - A空白 | ||
注意:空白管只需測定一次。
亞硝酸鹽含量計(jì)算:
用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:y=0.234x + 0.0002,R2= 0. 999 x為標(biāo)準(zhǔn)品亞硝酸濃度(μg/ml) y為吸光值A(chǔ)。
NO2-(μg/g)=(△A-0.0002)÷0.234×V樣÷(V樣÷V樣總×W)×0.6668
=(A – 0.086)÷0.234×1.5×0.6668÷W
=4.27×(△A-0.0002)÷W
V樣總:加入提取液體積,1.5 mL; V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.07mL;W:樣品質(zhì)量,g。
b.用96孔板測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:y=0.141x +0.095,R2= 0. 9991 x為標(biāo)準(zhǔn)品亞硝酸濃度(μg/ml) y為吸光值A(chǔ)。
NO2-(μg/g )=(△A-0.0002)÷0.141×V樣÷(V樣÷V樣總×W)×0.6668
=(△A-0.0002)÷0.141×1.5×0.6668÷W
=7.09×(△A-0.0002)÷W
V樣總:加入提取液體積,1.5 mL; V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.07mL;W:樣品質(zhì)量,g。
注意事項(xiàng):
試劑盒2-8℃保存。
試劑對人體有一定的危害,請穿實(shí)驗(yàn)服,戴手套操作。
若檢測出得OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍外,請將樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)臐饪s或稀釋(A540 <0.09濃縮,A540 > 1.5 適當(dāng)稀釋)。
檢出限為0.5μg/g。



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