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T4 多聚核苷酸激酶(3'磷酸酶活性缺失)

  • 更新時(shí)間:  2023-10-03
  • 產(chǎn)品型號(hào):  A-PJ1154
  • 簡(jiǎn)單描述
  • T4 多聚核苷酸激酶(3'磷酸酶活性缺失)儲(chǔ)存:-20℃ 可保存 2 年。
詳細(xì)介紹

商品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

T4 多聚核苷酸激酶(3'磷酸酶活性缺失)

200U、2000U

A-PJ1154

產(chǎn)品介紹:

描述:T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)能夠催化 ATP 的 γ-位磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到寡核苷酸鏈(雙鏈或單鏈 DNA 或 RNA)的 5’-羥基末端以及 3’-單磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶還具有3’磷酸酶活性,將3’磷酸基團(tuán)從寡核苷酸的 3’磷酸末端、脫氧 3’-單磷酸核苷和脫氧 3’-二磷酸核苷上水解掉。該酶經(jīng)后,其 3’磷酸酶活性缺失,但仍保留了所有激酶的活性。

儲(chǔ)存:-20℃ 可保存 2 年。
活性定義:
1Unit 指 37℃條件下,30 分鐘內(nèi)催化 1nmol 酸不溶性[32P] 摻入所需要的酶量。
注意:
(1)1×T4 PNK Buffer:70 mM Tris-HCl pH 7.6,10 mMMgCl2,5 mM DTT。
(2)熱失活:65°C 加熱 20 分鐘。
(3)一般來(lái)說(shuō),進(jìn)行激酶反應(yīng)之后是連接反應(yīng)。在這種情況下,T4 多聚核苷酸激酶反應(yīng)在連接酶反應(yīng)緩沖液中 37°C溫育 30 分鐘即可。反應(yīng)后的產(chǎn)物可直接進(jìn)行連接,無(wú)需改變緩沖液和進(jìn)行熱失活。如果連接時(shí)需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化狀態(tài),則需要在連接反應(yīng)前熱失活 T4 多聚核苷酸激酶。

\注意:1 pmol 的 5’末端 DNA,相當(dāng)于 1 μg 的 PCR 產(chǎn)物(3kb 大小)。


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