NCI-H661h661人大細胞肺癌細胞
NCI-H661[h661]人大細胞肺癌細胞
名稱 | NCI-H661 (人大細胞肺癌細胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | H661; H-661; NCIH661 |
種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃ |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
參考資料(來源文獻)
背景描述 | NCI-H661細胞源自一位43歲患有大細胞肺癌的男性白人的淋巴結(jié)；NCI-H661細胞缺乏產(chǎn)生粘液和鱗狀分化的亞顯微結(jié)構(gòu)和生化證據(jù)。NCI-H661細胞表達的p53mRNA易于檢測，明顯高于正常肺細胞的水平，與此同時，沒有出現(xiàn)總體性的結(jié)構(gòu)DNA崎變，它們可以說明存在點突變或很小的變異。NCI-H661細胞角蛋白和波形蛋白纖維染色陽性，神經(jīng)絲三聯(lián)體蛋白陰性。 |
年齡（性別） | 男；43歲 |
組織來源 | 肺 |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
腫瘤類型 | 肺癌細胞 |
生物安全等級 | 1 |
倍增時間 | ~60 hours |
保藏機構(gòu) | ATCC; HTB-183 |
二、細胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Hp-IgG ELISA Kit | 海藻巴斯德菌PCR試劑盒 |
Ubinuclein 1(UBN1)ELISA Kit | 駑巴貝斯蟲PCR試劑盒 |
advanced oxidation protein products,AOPP ELISA Kit | 禽腺病毒型PCR檢測試劑盒 |
LN ELISA Kit | 隱孢子蟲通用PCR檢測試劑盒 |
pERK ELISA Kit | 腸道病毒70型RT-PCR試劑盒 |
Aldosterone Syhase(ALDOS)ELISA Kit | 乙型肝炎病毒E型PCR試劑盒 |
M-CSF ELISA Kit | 雜色青霉PCR試劑盒 |
VA ELISA Kit | 產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌通用PCR試劑盒 |
Allopregnanolone(AP)ELISA Kit | 腸出血性大腸桿菌:血清型PCR檢測試劑盒 |
Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit | 猿猴錐蟲PCR檢測試劑盒 |
MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ ELISA Kit | GR 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體ELISA檢測試劑盒 |
Twist Transcription Factor(TWIST)ELISA Kit | AChRab 猴子乙酰受體抗體ELISA檢測試劑盒 |
Ubiquilin 3(UBQLN3)ELISA Kit | NCI-H661[h661]人大細胞肺癌細胞脂肪細胞脂肪suan結(jié)合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒 |
AIRA ELISA Kit | ACTH 兔子促腎上腺皮質(zhì)激suELISA檢測試劑盒 |
ADRP ELISA Kit | ADM 小鼠腎上腺髓質(zhì)suELISA檢測試劑盒 |
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