這些關于大豆PCR檢測試劑盒的使用方法你要認真看
瀏覽次數(shù)：743發(fā)布日期：2021-01-23
大豆PCR檢測試劑盒是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量和定性分析。
樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
注：所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1、樣本處理：
待檢樣本的核酸提取可采用RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質控品及陰性質控品無需提取，可直接使用。
2、擴增試劑準備：
取N個（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19μlRT-PCR酶。
1、將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉移至樣本處理區(qū)；
2、加樣（樣本處理區(qū)）
3、在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5μl，蓋緊管蓋，于6000rpm離心10s，轉移至擴增區(qū)。
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