有關(guān)牛血清白蛋白試劑盒的操作步驟，以下有詳細(xì)說明
瀏覽次數(shù)：699發(fā)布日期：2021-09-24
牛血清白蛋白是來自牛的血清白蛋白，是一種小而穩(wěn)定的中等非反應(yīng)性蛋白，它通常用作測(cè)定蛋白質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品和免疫組織化學(xué)中的阻斷劑。在免疫組織化學(xué)中，組織切片通常與BSA阻斷劑孵育以結(jié)合非特異性結(jié)合位點(diǎn)。BSA也用作細(xì)胞和微生物培養(yǎng)物中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。在限制性消化中，BSA用于在DNA消化過程中穩(wěn)定一些酶，并防止酶對(duì)反應(yīng)管，移液管吸頭和其他血管的粘附。
1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3、待測(cè)樣本孔先加生物素10μL，再加待測(cè)樣本50μL；
4、隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5 次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7、每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
洗板方法：
1、手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。
2、自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
結(jié)果判斷：
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
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