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土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)測(cè)試盒

  • 更新時(shí)間:  2023-10-15
  • 產(chǎn)品型號(hào):  AS6321295
  • 簡(jiǎn)單描述
  • 土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)測(cè)試盒是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍,分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。
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貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

AS6321295

土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)測(cè)試盒

100管/96樣

AS6321295

土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)測(cè)試盒

50管/48樣

測(cè)定意義:                           

土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍,分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。

測(cè)定原理:

堿性環(huán)境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成,通過(guò)測(cè)定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。

自備儀器和用品:

可見(jiàn)光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水、無(wú)水乙醇和甲苯。

試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。用前加100mL蒸餾水充分溶解。

試劑三:液體×1瓶,4℃保存。

試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加576μL無(wú)水乙醇(自備),24μL蒸餾水充分溶解。(變褐色后不能再使用)

標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1瓶,0.5μmol/mL苯標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。

催化反應(yīng):

稱取風(fēng)干混勻土壤約0.1g,加入50μL甲苯(自備),輕搖15min;加400μL試劑一并且搖勻后,置于37℃恒溫培養(yǎng)箱,開(kāi)始計(jì)時(shí),催化反應(yīng)24h;到時(shí)后迅速加入1mL試劑二充分混勻,以終止酶催化的反應(yīng)。8000g,25℃離心10min,取上清液置于冰上待測(cè)。

顯色反應(yīng):

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 空白管:取微量玻璃比色皿/酶標(biāo)板,加入10μL蒸餾水,20μL試劑三,4μL試劑四,充分混勻,顯色后再加蒸餾水166μL,混勻后25℃靜置30 min,于660 nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管:微量玻璃比色皿/酶標(biāo)板,加入10μL標(biāo)準(zhǔn)液,20μL試劑三,4μL試劑四,充分混勻,顯色后再加蒸餾水166μL,混勻后25℃靜置30 min,于660 nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

4. 測(cè)定管:微量玻璃比色皿/酶標(biāo)板,加入10μL上清液,20μL試劑三,4μL試劑四,充分混勻,顯色后再加蒸餾水166μL,混勻后25℃靜置30 min,于660 nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

S-ALP活性計(jì)算公式:

活性單位定義:37℃中每克土壤每天釋放1μmol酚為1個(gè)酶活單位。

S-AKP/ALP(μmol/d/g 土樣)=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)]×V總÷W÷T

= 0.725×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W

C標(biāo)準(zhǔn)液:0.5μmol/mL;V總:催化體系總體積,1.45mL;W:土壤樣品質(zhì)量,g;T:催化反應(yīng)時(shí)間,24 h=1 d。

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