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土壤堿性蛋白酶(SALPT)測試盒

  • 更新時間:  2023-10-15
  • 產(chǎn)品型號:  AS6321302
  • 簡單描述
  • 土壤堿性蛋白酶(SALPT)測試盒在堿性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解,與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。
詳細(xì)介紹

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貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

AS6321302

土壤堿性蛋白酶(SALPT)測試盒

100管/48樣

AS6321302

土壤堿性蛋白酶(SALPT)測試盒

50管/24樣

測定意義:

土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化,其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-ALPT在堿性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解,與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。

測定原理:

堿性條件下,S-ALPT可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨;在堿性條件下,酪氨還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán);在680nm有特征吸收峰。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、雙蒸水

試劑組成和配置:

試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入6ml蒸餾水充分溶解;用不完的試劑4℃保存;

試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入2mL試劑七,沸水浴加熱溶解,然后加入8ml試劑一,充分混勻備用,用不完的試劑4℃保存; 

試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入30ml蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑4℃保存;

試劑五:液體8mL×1瓶,4℃保存;

試劑六:液體1.5mL×1支,0.05mg/ml標(biāo)準(zhǔn)酪氨溶液,4℃保存;

試劑七:液體5mL×1瓶,4℃保存;

樣品處理:

新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。

測定操作:

1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至680nm,蒸餾水調(diào)零。

2、試劑二、三和四40℃水浴10min。

3、樣本測定:

試劑名稱

測定管

對照管

風(fēng)干土樣(g)

0.02

0.02

試劑一(μL)


150

試劑三(μL)

150


混勻后,40℃水浴30min,振蕩5-6次,使土樣與反應(yīng)液充分接觸

試劑二(μL)

50

50

混勻,8000g 25℃離心10min,取上清液,在EP管或96孔板中加入下列試劑


測定管

對照管

標(biāo)準(zhǔn)管

上清液(μL)

60

60


試劑六(μL)



60

試劑四(μL)

280

280

280

試劑五(μL)

60

60

60

混勻,40℃水浴20min,8000g 25℃離心10min,取上清液200μL,680nm下讀取各管吸光值A(chǔ)

注意:標(biāo)準(zhǔn)管只需測一次。每個測定管設(shè)一個對照管。

S-ALPT活性計算:

單位定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg酪氨為一個 S-ALPT活力單位。

S-ALPT(mg/d/g土樣)=C標(biāo)準(zhǔn)×(A測定管-A對照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管×V反總÷W÷T=24×(A測定管-A對照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管

C標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)管濃度,0.05mg/mL;V反總:反應(yīng)體系總體積,0.2mL;T:反應(yīng)時間,30min=1/48d; W:樣本質(zhì)量,0.02g。

1.jpg


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