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β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)測試盒(比色法)

  • 更新時(shí)間:  2023-10-15
  • 產(chǎn)品型號(hào):  AS6321252
  • 簡單描述
  • β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)測試盒(比色法)是一種參與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移過程的基質(zhì)降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。該酶在肝細(xì)胞中含量較高。此外在胃癌組織中含量豐富,測定胃液β-GD活性對于研究胃癌具有重要的意義。
詳細(xì)介紹

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貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

AS6321252

β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)測試盒(比色法)

100管/96樣

AS6321252

β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)測試盒(比色法)

50管/48樣

測定意義

β-GD廣泛存在于動(dòng)物組織中,是一種參與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移過程的基質(zhì)降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。該酶在肝細(xì)胞中含量較高。此外在胃癌組織中含量豐富,測定胃液β-GD活性對于研究胃癌具有重要的意義。

測定原理

β-GD催化苯 β-D-葡萄糖醛酸產(chǎn)生游離的酞,通過測定苯含量反應(yīng)該酶活性高低。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體2mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑仍-20℃保存;

試劑三:液體15mL×1瓶,4℃保存;

試劑四:1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10mL,4℃保存;

樣品測定的前處理

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至540nm,蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定

試劑名稱(μL)

加樣孔

測定管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管

試劑一

20

20

20

試劑二

20

20

20

樣本

10



1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液


10


蒸餾水



10

 混勻后,37℃反應(yīng)30min

試劑三

150

150

150

混勻, 540nm下測定各管吸光值

注意:標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測一次。
 

β-GD活性計(jì)算

(1)按樣本鮮重計(jì)算:

單位定義:每小時(shí)每g鮮重樣品中催化產(chǎn)生 1μmol酚的量為一個(gè)活力單位。

β-GD(μmol/h/g 鮮重)= (C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=2×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W

(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位定義:每小時(shí)每mg組織蛋白催化產(chǎn)生 1μmol酚的量為一個(gè)活力單位。

β-GD(μmol/h/mg prot)= (C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=2×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr

C標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)管濃度, 1μmol/mL;V1:加入樣本體積:0.01mL;V2:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,0.5h;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g。

1.jpg


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