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波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒供應商

  • 更新時間:  2019-04-26
  • 產品型號:  
  • 簡單描述
  • 波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒供應商是即用型PCR試劑盒的改良產品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途。
詳細介紹

樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

產品名稱

波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒供應商

英文名稱

Bordetella spp.PCR

分類

PCR檢測試劑盒


反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

使用及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

ELISAKitforHumanInactivedipeptidylpeptidase1029702-25-8 20mg Isovitexin  78-5000 pg/mL異牡荊苷

AK4/AdenylateKinase4/AK3L1抗體,鼠單抗64439-81-2 C20H16N2O5Irinotecan HCL≥98%ELISA   WB   IP  鹽酸伊立替康

人熱休克同源物71kDa蛋白(Heatshockcognate71kDaprotein)ELISA試劑盒12542-36-8 20mg Acetate gossypol  0.312-20 ng/mL醋酸棉

人胰十二指腸同源盒蛋白1(PDX-1)ELISA試劑盒1mg 15.6-1000 pg/mLFadogia (Fadogia agrestis) Root Stem Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE)

ELISAKitforHumanMucin-3A5G 0.625-40 ng/mL4-叔丁基啶 4-tert-Butylpyridine >96.0%(GC&T)

豬胃消化粉163-03545 250gWako 163-03545 和光純藥 現(xiàn)貨

人Reprimo蛋白(RPRM)ELISA試劑盒5G 0.156-10 ng/mL芐基丙二酸 Benzylmalonic Acid >98.0%(GC&T)

大鼠牙周膜干細胞 20mg HPLC≥98%Honokiol用于含量測定5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶和厚樸

LDLReceptor/LDLR抗體(PE),兔單抗25mgFCM   芹菜素-7-葡萄糖苷 APIGENIN-7-O-GLUCOSIDE (COSMOSIIN)(P)

水泡病毒(SVDV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)35790-95-5 20mgα-hederin HPLC≥98% 0.312-20 ng/mLα-常春藤苷;α-常春藤素

CD155/PVR/NECL5抗體,兔單抗 121-92-6 100mg 0.999ELISA   WB   IP  3-硝基苯甲酸

人NADH細胞色素b5還原酶2(b5R.2)ELISA試劑盒 20mgOnjisaponin A HPLC≥98% 0.156-10 ng/mL遠志皂苷A

PLA2G1B抗體,兔多抗13241-28-6HPLC≥98%A076220mg/支ELISA   大黃-8-O-葡萄糖苷

人喉癌細胞,TU212細胞 20mg HPLC≥98%Glucosyl-vitexin牡荊素葡萄糖苷用于含量測定1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶牡荊素葡萄糖苷

B7-H5/GI24/VISTA抗體,兔多抗,抗原親和純化117-39-5C15H10O7Quercetin≥98%ELISA   槲皮素

人角蛋白13(KRT13)ELISA試劑盒250G 0.312-20 ng/mL1,2,4-丁三 1,2,4-Butanetriol >97.0%(GC)

波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒供應商木蘭花堿;唐松草堿,玉蘭堿,洋玉蘭堿  HPLC≥98% magnoflorine 兔脈絡膜成纖維細胞 用于含量測定

雪膽素甲 20mg  Curcurbitacin IIa ELISAKitforHumanDysbindin

CARBENOXOLONE(RG)  250mg 人跨膜受體蛋白(NOTCH1)ELISA試劑盒

辛可尼丁 CINCHONIDINE(RG)  1g ECM1抗體,鼠單抗

DL-薄荷 20mg  Menthol ELISAKitforHumanMacrosialin

9003-05-8 Polyacrylamide聚合物標準品  2594446 糖發(fā)酵管培養(yǎng)基/糖膽鹽發(fā)酵管培養(yǎng)基/糖復發(fā)酵管培養(yǎng)基/糖復發(fā)酵培養(yǎng)基/糖復發(fā)酵胨水/LactoseFermentBroth

芍藥內酯苷 20mg Alibiflorin 人γ-分泌酶(γ-secretase/GACE)ELISA試劑盒 HPLC≥98%

PVP K-30 聚乙咯烷  100g MFB培養(yǎng)基

 


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