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牛丘疹性口炎病毒PCR檢測試劑盒

  • 更新時間:  2019-04-26
  • 產(chǎn)品型號:  
  • 簡單描述
  • 牛丘疹性口炎病毒PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
詳細介紹

樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

產(chǎn)品名稱

牛丘疹性口炎病毒PCR檢測試劑盒

英文名稱

Bovine Papular Stomatitis Virus(BPSV)PCR

分類

PCR檢測試劑盒

?
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

人12-脂酶/脂加氧酶(LOX-12)ELISA試劑盒13063-04-2 20mgNitidine chloride HPLC≥98% 0.78-50 ng/mL氯化兩面針堿

CyclinA1/CCNA1抗體,兔多抗,抗原親和純化480-16-0;654055-01-3HPLC≥98%A021320mg/支ELISA   WB   IP  桑色素

HOXB8抗體,兔多抗,抗原親和純化5mgWB   IP   升麻素苷H-2 CIMICIFUGOSIDE H-2(AS)

CD59抗體(APC),兔單抗61301-33-5C22H24O6Schisandrin C≥98%FCM   五味子丙素

人高遷移率族蛋白B2(HMGB2)ELISA試劑盒19912-84-65mg Chamigrenal 0.312-20 ng/mL恰米醛

堿性蛋白胨水顆粒1g/25g/500g 225ml/袋*103-吲哚乙酸/吲哚乙酸/生長素/IAA

ELISAKitforHumanMetallothionein-1A25G 1.56-100 ng/mL4-苯甲酰啶 4-Benzoylpyridine >99.0%(T)

胰化大豆硫酸鎂瓊脂(TSAM)196-13401 250gWako 196-13401動物疾病造模試劑

人腎素相關(guān)蛋白Rap-1A(Ras-relatedproteinRap-1A)ELISA試劑盒10mg 0.156-10 ng/mL苯磷硫胺 BENFOTIAMINE(P)

ELISAKitforHumanSugartransporterSWEET1100mg 0.156-10 ng/mL穿心蓮內(nèi)酯 ANDROGRAPHOLIDE(P)

SCML2抗體,兔多抗,抗原親和純化1gWB   薯蕷皂素 DIOSGENIN(SAPOGENIN)(AS)

豬瘟病毒(CSFV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)84272-85-5 20mg5-O-Methylvisammioside HPLC≥98% 0.78-50 ng/mL5-O-甲基維斯阿米苷

CarbonicAnhydraseIX/CA9抗體,兔單抗 106-70-7 1mL 0.998ELISA   FCM   己酸甲酯

人酪氨酸蛋白激酶CSK(Tyrosine-proteinkinaseCSK)ELISA試劑盒509-18-2 20mgBelsoline HPLC≥98% 0.156-10 ng/mL硬飛燕草堿

TH/TyrosineHydroxylase抗體,兔多抗,抗原親和純化57-87-4HPLC≥98%A0630100mg/支ELISA   麥角甾;麥角固

ELISAKitforHumanFrizzled-45945-50-6 20mg Monotropein 0.312-20 ng/mL水晶蘭苷

牛丘疹性口炎病毒PCR檢測試劑盒澳洲茄堿;α-澳洲茄堿,茄解堿  HPLC≥98% Solasonine 人神經(jīng)母細胞瘤細胞,SK-N-SH細胞 用于含量測定

變性劑濃度等級凝膠電泳分子量標記 I  312-06414 葡萄糖酸鹽-雙岐桿菌鑒定

4-異丙苯甲 CUMINYLALCOHOL(AS)  100mg 人粘蛋白1(MUC1)ELISA試劑盒

烏藥醚內(nèi)酯 HPLC≥98% A0367 ICOSLigand/B7-H2抗體(PE),鼠單抗 20mg/支

20(R)-人參皂苷Rh1 C36H62O9 20(R)-Ginsenoside Rh1 FumarateHydratase/FH抗體,兔多抗,抗原親和純化 ≥98%

肽合成/有機合成用縮合劑HATU和HBTU  349-03622 1%NaCl纖維二糖

川續(xù)斷皂苷VI C47H76O18 Akebia saponin D LRP11抗體,兔多抗,抗原親和純化 ≥98%

襄五脂素 5mg  Chicanin 人11β羥基類固脫氫酶1型(HSD11b1)ELISA試劑盒

 


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