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腦多頭囊蟲PCR檢測試劑盒說明書

  • 更新時間:  2019-04-29
  • 產(chǎn)品型號:  
  • 簡單描述
  • 腦多頭囊蟲PCR檢測試劑盒說明書是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
詳細介紹

特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

產(chǎn)品名稱

腦多頭囊蟲PCR檢測試劑盒說明書

英文名稱

Coenurus cerebralisPCR

分類

PCR檢測試劑盒

樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
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使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

人牙本質(zhì)唾液磷酸蛋白(DSPP)ELISA試劑盒38647-10-8   20mg Tripdiolide  12.5-800 pg/mL雷公藤乙素

TIMD4抗體,兔多抗,抗原親和純化78214-33-2C36H62O820(S)-Ginsenoside Rh2≥98%ELISA   20(S)-人參皂苷Rh2

ELISAKitforHumanInterleukin-28B19885-10-0 20mg Alisol A 15.6-1000 pg/mL澤瀉A

PYG液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)10ml棕色瓶裝液體,有效成分1g 250gHygromycin B 潮霉素B(100mg/ml)

TTC營養(yǎng)瓊脂/三苯四唑營養(yǎng)瓊脂/氯化三苯四氮營養(yǎng)瓊脂/紅四氮唑營養(yǎng)瓊脂/三苯基氯化四氮唑營養(yǎng)瓊脂/TCCNutrientAgarC9754用于細菌總數(shù)測定時防止菌落蔓延Colchicine 秋水仙堿

真菌培養(yǎng)基/霉菌培養(yǎng)基/MouldMedium067-06471用于無菌試驗及真菌培養(yǎng)對苯酸鹽FMTS114435-86-8

ELISAKitforHumanSerine/arginine-richsplicingfactor110mg 0.312-20 ng/mL地弗地衣酸 DIFFRACTAIC ACID(SH)

人胚腎上皮包裝細胞,GP2-293細胞 20mg HPLC≥98%Bilobetin用于含量測定1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶7-去基銀杏雙黃;7-去基銀杏雙黃;白果素 7-去基銀杏雙黃

PHB2抗體,兔多抗,抗原親和純化WB   IF   ICC/IF  矢車菊素-3,5-二葡萄糖苷 CYANIDIN-3,5-DIGLUCOSIDE(P)(PLEASE CALL)

型副傷寒沙門氏菌(SPA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)539-15-1 20mgHordenine HPLC≥98% 15.6-1000 umol/L大麥芽堿;4-(2-二基氨基乙基)苯

TransferrinReceptor/TFRC/CD71抗體(PerCP),兔單抗39432-56-9HPLC≥98%A025420mg/支FCM   刺五加苷E

ELISAKitforHumanCollagenalpha-1(XVIII)chain30984-80-610mg Dauricinoline 0.156-10 ng/mL蝙蝠葛新諾林堿

HPRG/HGR抗體,鼠單抗142409-09-4HPLC≥98%A08055mg/支ELISA   

γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒6078-17-7 20mg BerbaMine dihydrochloride 0.78-50 ng/mL鹽酸小檗胺

Galectin-3/LGALS3抗體,鼠單抗10 x 1gELISA   WB   IP  水溶性維生素標準品試劑盒(10種) VITAMIN STANDARDS KIT: WATER SOLUBLE(P)

ELISAKitforHumanLamininsubunitbeta-2500G 0.625-40 ng/mL2,3-丁二 (立體異構(gòu)體的混合物) 2,3-Butanediol (mixture of stereoisomers)>97.0%(GC)

腦多頭囊蟲PCR檢測試劑盒說明書康唑(含干冰運輸費)  100mg  0.998 CXCL12/SDF-1beta抗體,兔多抗,抗原親和純化

聯(lián)苯芐唑  100mg  0.993 LY6K/Lymphocyteantigen6K抗體,兔多抗,抗原親和純化

9004 54 0 葡聚糖 分子量標準品  9004 54 0 鼠李糖發(fā)酵管

L-纈氨酸  25g//100g 人非小細胞肺癌細胞,NCI-H1299細胞

4,4'-二溴聯(lián)苯 DIBROMOBIPHENYL, 4,4'-(SG)  1g ELISAKitforHumanTyrosine-proteinkinaseMer

綠原酸 CHLOROGENIC ACID(P) (AHP Verified & Compendial Traceable)  50mg ELISAKitforHumanNetrinreceptorUNC5C

尿囊素 HPLC≥98% A0661 CarbonicAnhydraseXIV/CA14抗體,兔多抗,抗原親和純化 100mg/支

鹽酸益母草堿;益母草 20mg Leonurine hydrochloride 半胱氨酸(Cysteine)ELISA試劑盒 HPLC≥98%

 


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