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腺熱埃里希體PCR檢測試劑盒供應(yīng)商

  • 更新時間:  2019-04-30
  • 產(chǎn)品型號:  
  • 簡單描述
  • 腺熱埃里希體PCR檢測試劑盒供應(yīng)商是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
詳細(xì)介紹

特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

產(chǎn)品名稱

腺熱埃里希體PCR檢測試劑盒供應(yīng)商

英文名稱

Erlichia sennetsuPCR

分類

PCR檢測試劑盒

樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
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使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

人白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞科B成員1(LILRB1)ELISA試劑盒25G 31.2-2000 pg/mL1-溴-2-萘 1-Bromo-2-naphthol >95.0%(GC)

不對稱二基精氨酸(Asymmetricdimethylarginine)ELISA試劑盒61371-55-9 20mgGriffonilide HPLC≥98% 0.625-40 ng/mL格列風(fēng)內(nèi)酯

CTLA-4/CD152抗體,鼠單抗905-99-7HPLC≥99%A002420mg/支ELISA   隱綠原酸(4-咖??鼘幩幔?/span>

ELISAKitforHumanMembranecofactorprotein465-39-4 20mg Resibufogenin 0.312-20 ng/mL酯蟾毒配基

ASGPR1抗體,兔多抗18649-93-9C30H48O4Alisol B HPLC≥98%ELISA   澤瀉B

人神經(jīng)調(diào)制蛋白(Neuromodulin)ELISA試劑盒521-32-410mg Bilobetin  78-5000 pg/mL7-去基銀杏雙黃

HAGH/GLO2/GlyoxalaseII抗體,兔多抗1gELISA   DTNB 5,5-二硫代雙(2-硝基苯酸)

人葡糖神經(jīng)酰胺酶(Glucosylceramidase)ELISA試劑盒306-08-1 20mg Homovanillic acid 0.312-20 ng/mL高香草酸

CCFA瓊脂基礎(chǔ)fk-10953 250gCAS:70674-90-7,硫酸長春質(zhì)堿標(biāo)準(zhǔn)品

人蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒10mg 1.56-100 ng/mLS-(5'-腺苷)-L-氯化蛋氨酸 ADENOSYL-L-METHIONINE CHLORIDE, S-(RG)

ONPG發(fā)酵管135610-90-1BR135610-90-1 | Fmoc-D-His(Trt)-OH

ELISAKitforHumanTryptasealpha/beta-11g 1.56-100 ng/mL硫酸軟骨素A鈉鹽 CHONDROITIN SULFATE SODIUM SALT BOVINE(RG)

小鼠子宮平滑肌細(xì)胞 20mg HPLC≥98%valepotriate用于含量測定5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶纈草三酯;纈草素

c-Met/HGFR抗體,兔多抗,抗原親和純化50mgWB   棕櫚酸咖 CAFESTOL PALMITATE(RG)

人前原痛蛋白(PNOC)ELISA試劑盒1mg 0.156-10 ng/mLSchisandra (Schisandra chinensis) Berry Extract #3 BXL(REQUEST QUOTE)

GPA33抗體,兔多抗,抗原親和純化18797-80-3HPLC≥98%A044020mg/支ELISA   IHC-P   乙酰紫堇靈; 乙酰紫堇靈堿

腺熱埃里希體PCR檢測試劑盒供應(yīng)商貝母辛 10mg  Peimisine 人鈣蛋白酶6(Calpain-6)ELISA試劑盒

CAFFEINE(SH)  25mg ELISAKitforHumanNoggin

硼酸三異丙酯 Triisopropyl Borate >98.0%(T)  25ML 人無翅型MMTV整合位點家族成員2B(WNT2B)ELISA試劑盒

喬松素 HPLC≥98% A0778 CD200抗體,鼠單抗 20mg/支

Trans-Zeatin 反玉米素  50mg 含100mlBolton肉湯均質(zhì)袋

碳導(dǎo)電膠502  502 42℃生長培養(yǎng)基/42℃GrowthMedium

獐牙菜苷 20mg  Sweroside ELISAKitforHumanGlutaminasekidneyisoform,mitochondrial

3,6-二芥子?;崽? HPLC≥90% 3,6’-Disinapoyl sucrose 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,A172細(xì)胞 用于含量測定

 


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